Таксономическое положение
Хламидии относятся к порядку Chlamydiales, семейству Chlamydiaceae, роду
Chlamydia. Род Chlamydia включает более 10 видов. Патогенными для человека
являются виды C. trachomatis, C. pneumoniae и C. psittaci.
C. trachomatis является исключительно паразитом человека и подразделяется
на 18 сероваров, которые объединены в 2 биовара: биовар трахома и биовар
лимфогранулема венерум или LGW. Серовары А-С (А, В, Ва, С) C. trachomatis
вызывают трахому, серовары D-K (D, E, F, G, H, I, J, K) – генитальные инфекции,
передающиеся половым путем (урогенитальный хламидиоз), серовары L1-L3 (L1,
L2, L3) передаются половым путем и поражают лимфатическую ткань, вызывая
венерическую лимфогранулему.
C. pneumoniae вызывает заболевания как у человека, так и животных. Этот вид
объединяет 4 биовара. Биовар TWAR вызывает респираторные инфекции у
человека.
C. psittaci вызывает различные заболевания у человека, животных и птиц,
включает 13 сероваров. Основными хозяевами этого вида являются птицы. У
человека этот возбудитель вызывает пситтакоз.
Морфологические и тинкториальные свойства
Хламидии представляют собой мелкие грамотрицательные бактерии
шаровидной или овоидной формы. Спор и капсул не образуют, жгутиков не имеют.
Хламидии существуют в двух формах (рисунок 2):
- ЭТ - элементарные тельца;
- РТ - ретикулярные (сетчатые) тельца.
Рисунок 2 – Элементарные и ретикулярные тельца хламидий.
Элементарные тельца являются внеклеточной (покоящейся) формой
хламидий. Они представляют собой мелкие сферические образования размером 0,2-
6
0,4 мкм с толстой клеточной стенкой, окрашиваются по Романовскому-Гимзе в
красный (розовый) цвет, метаболически не активны, не способны к делению, не
чувствительны к антибиотикам. Элементарные тельца способны к адгезии на
эпителиальных клетках с помощью хламидийных мембранных протеинов (МОМР –
Major Outer Membrane Protein, PОМРs – Polymorphic Membrane Protein). После
проникновения путем эндоцитоза внутрь эукариотической клетки элементарные
тельца внутри вакуоли трансформируются в ретикулярные тельца.
Ретикулярные (сетчатые) тельца являются внутриклеточной (вегетативной)
формой хламидий. Они крупнее элементарных телец в несколько раз, их размер
достигает 0,8-1,5 мкм, они имеют тонкую клеточную стенку, окрашиваются по
Романовскому-Гимзе в голубой или фиолетовый цвет, метаболически активны,
способны к бинарному делению, чувствительны к антибиотикам. Ретикулярные
тельца находятся в тесном контакте с мембраной вакуоли благодаря системе
секреции III типа. Внутри клеток делящиеся ретикулярные тельца формируют
околоядерные скопления - тельца включений (рисунок 3).
Рисунок 3 – Ретикулярные (РТ) и элементарные (ЭТ) тельца хламидий в
эпителиальных клетках канала шейки матки.
Тельца включений располагаются в вакуолях и окутаны оболочкой (мантией),
отчего и происходит название хламидий.
В последнее время выделяют еще одну форму хламидий – так называемые
аберрантные тельца или латентную форму. Эти тельца представляют собой
внутриклеточную неразмножающуюся (некультивируемую) форму, отвечающую за
персистенцию возбудителя. Они лишены МОМР и секретируют в большом
количестве стрессовые протеины (Chsp60 – heat shock protein spesifique des
chlamidiae, белки теплового шока массой 60 кД).
Клеточная стенка хламидий состоит из внутренней цитоплазматической
мембраны и внешней мембраны, разделенных периплазматическим пространством
(рисунок 4).
7
ЦПМ
Наружная
мембрана
OMP
MFP
ABC
ЦПМ
Наружная
мембрана
OMP
MFP
ABC
ЦПМ
Наружная
мембрана
OMP
MFP
ABC
ЦПМ
Наружная
мембрана
OMP
MFP
ABC
Внешняя
мембрана
Периплазматическое
пространство
Внутренняя
мембрана
Гликолипиды
OMP2 MOMP
Рисунок 4 – Строение клеточной стенки хламидий.
Каждая мембрана двойная. В отличие от других грамотрицательных бактерий,
клеточная стенка хламидий не имеет пептидогликанового слоя. В состав клеточной
стенки входят пептиды и гликолипиды (аналоги липополисахаридов клеточной
стенки грамотрицательных бактерий). Основными белками клеточной стенки
хламидий являются белки внешней мембраны ОМР2 (Outer membrane protein) и
МОМР (Major outer membrane protein). Белок ОМР2 обнаруживается у ЭТ. Он
участвует в процессах прикрепления ЭТ к эукариотическим клеткам. Белок МОМР
обнаруживается как у ЭТ, так и у РТ. Этот белок выполняет функции как адгезина,
так и порина.
Геном хламидий имеет небольшой размер. Он состоит из нуклеоида
(бактериальной хромосомы) и плазмид. Большинство штаммов рода Chlamydia
имеют плазмиду рСТ. Плазмиды хламидий несут “гены адаптации”, многие из
которых представляют транспозоны.
Схематически изображение клетки хламидий можно представить следующим
образом (рисунок 5).
ЛПС
МОМР
ОМР
Нуклеоид
Плазмиды
Рисунок 5 – Схематическое изображение клетки хламидий.
При окраске по Граму хламидии приобретают красный цвет. Основным
методом окраски хламидий является метод Романовского-Гимзы (рисунок 6).
8
Рисунок 6 – Включения внутриклеточно расположенных хламидий (указаны
стрелками), окраска по Романовскому-Гимзе.
Культивирование хламидий
Хламидии не растут на питательных средах. Они являются облигатными
внутриклеточными энергетическими паразитами. По способности синтезировать
АТФ хламидии являются метаболически неактивными и для своей
жизнедеятельности используют внешние источники энергии. Элементарные тельца
используют в качестве источника энергии глюкоза-6-фосфат, высвобождающийся из
разрушенных клеток, а ретикулярные тельца используют напрямую АТФ клеткихозяина.
Хламидии культивируют в желточном мешке развивающихся куриных
эмбрионов и в культуре клеток HeLa, McCoy (рисунок 7).
Рисунок 7 – Однослойная культура клеток после инкубирования хламидий.
Цитоплазма инфицированных клеток выг
